Как криоконсервацията увеличава шансовете за наторяване?
При естествено оплождане тайната на мъжките сексуални жлези се смесва частично с клетките на епидермиса, в резултат на което се получава известна промяна в рН на средата, което води до разрушаване на липопротеиновото покритие на сперматозоидите, т.е. за тяхното активиране. В това състояние продължителността на живота на репродуктивните клетки е силно ограничена, което изключва тяхното по-нататъшно използване за IVF. Ето защо се използва методът на криоконсервиране.
Тази техника значително увеличава срока на годност на сперматозоидите и позволява:
- намаляване на двигателната активност на сперматозоидите;
- им осигурява допълнителен източник на енергия;
- защитава мембраните на зародишните клетки от унищожаване;
- предотвратява натрупването на токсични метаболитни продукти;
- блокира възпроизвеждането на микроорганизми в еякулата.
Какви средства се използват за съхраняване на спермата?
За да се улесни така нареченият процес на раздробяване на еякулат, необходим за изолирането на зародишните клетки от него, предварително разредете сперматозоидите. Използват се специални реактиви.
Досега е обичайно да се използват синтетични среди за съхранение на сперма, като всяка от тях изисква специални условия. Обикновено този вид среда се състои от няколко компонента, обикновено поне три. Така че, в тяхната структура е възможно да се разпределят захар, най-често и се използват глюкоза и лактоза, натриев цитрат.
Ако говорим за специфични химични съединения, които могат да бъдат използвани като среда за съхранение на сперматозоиди, то между тях може да се нарече Tris-буфер, Trilon B, EDTA, Spermosan PPK.
При какви условия се съхранява еякулата?
Технологията на замразяване и съхранение на сперматозоидите изисква спазване на специален режим на охлаждане, както и използването на специални устройства. В този случай самата лабораторна стая задължително трябва да бъде оборудвана с устройства, които стерилизират въздуха.
Преди да се събере еякулата, всички необходими устройства за криоконсервиране, по-специално всички видове колби, градуирани цилиндри, пипети, хартиени филтри се стерилизират в специален шкаф при температура 130-150 градуса. Преди процедурата за директно вземане на проби те се поставят в специален термостат, който поддържа постоянна температура от 37 градуса.
След като пробата от мъжки сперма се отнема, тя се поставя в стерилна колба. Температурата на съхранение на сперматозоидите трябва да бъде постоянна. Процесът на охлаждане се осъществява на 2 етапа.
За да се използва еякулат, замразен по-рано, съдът заедно с него се поставя в топла вода, където се извършва бавно размразяване. След това, използваните криопротектиращи средства се отстраняват чрез повторно повторно утаяване на спермата върху центрофугата. След това само семенната течност се заменя с хранителна среда, в която впоследствие се поставят сперматозоидите.